Lapisan bungalan adalah fraksi sampel darah antikoagulan yang mengandung sebagian besar leukosit dan trombosit setelah sentrifugasi . [1]

Lapisan trombosit dan leukosit ("lapisan bungalan") antara eritrosit dan plasma darah setelah sentrifugasi lembut seluruh darah dengan antikoagulan natrium etilendiamintetraasetat.

Keterangan

sunting
 
Komponen darah setelah sentrifugasi

Setelah sentrifugasi, lapisan cairan bening ( plasma ) dapat dibedakan, lapisan cairan merah yang mengandung eritrosit, dan lapisan tipis di antaranya. Berisi kurang dari 1% total volume sampel darah, lapisan bungalan (disebut demikian karena biasanya berwarna bungalan ), mengandung sebagian besar leukosit dan trombosit . [2] [3] Lapisan bungalan biasanya berwarna keputihan, tetapi terkadang berwarna hijau jika sampel darah mengandung sejumlah besar neutrofil, yang kaya akan mieloperoksidase berwarna hijau.

 
Darah manusia setelah pemisahan dengan sentrifugasi. Plasma (lapisan atas), lapisan bungalan (tengah, lapisan berwarna putih) dan lapisan eritrosit (sel darah merah) (bawah) dapat dilihat.

Lapisan bungalan biasanya digunakan untuk ekstraksi DNA, [4] dengan leukosit menyediakan sumber sel berinti yang kira-kira 10 kali lebih terkonsentrasi. [5] Lapisan ini diekstraksi dari darah mamalia karena eritrosit mamalia tidak berinti dan tidak mengandung DNA. Protokol yang umum adalah menyimpan spesimen lapisan bungalan untuk isolasi DNA di masa depan dan spesimen ini mungkin tetap berada dalam penyimpanan beku selama bertahun-tahun. [6]

Kegunaan diagnostik

sunting

Lapisan bungalan kuantitatif (QBC), berdasarkan stratifikasi sentrifugal komponen darah, merupakan uji laboratorium untuk mendeteksi parasit malaria, serta parasit darah lainnya. [7]

Darah diambil dalam tabung kapiler QBC yang dilapisi dengan jingga akridin (pewarna fluoresen) dan disentrifugasi; eritrosit parasit yang berfluoresensi terkonsentrasi dalam suatu lapisan yang kemudian dapat diamati dengan mikroskop fluoresensi, [8] di bawah radiasi ultraviolet pada antarmuka antara eritrosit dan lapisan bungalan. Tes ini lebih sensitif dibandingkan tes sediaan apus tebal konvensional dan pada lebih dari 90% kasus, spesies parasit juga dapat diidentifikasi. [9] [10]

Dalam kasus jumlah leukosit yang sangat rendah, mungkin sulit untuk melakukan diferensial manual dari berbagai jenisnya dan hampir tidak mungkin untuk mendapatkan diferensial otomatis. Dalam kasus seperti ini, teknolog medis dapat memperoleh lapisan bungalan yang dapat digunakan untuk membuat apusan darah. Apusan ini mengandung jumlah leukosit yang jauh lebih tinggi dibandingkan darah utuh. [11]

Referensi

sunting
  1. ^ Cottler-Fox, Michele; Montgomery, Matthew; Theus, John (2009-01-01), Treleaven, Jennifer; Barrett, A John, ed., "CHAPTER 24 - Collection and processing of marrow and blood hematopoietic stem cells", Hematopoietic Stem Cell Transplantation in Clinical Practice (dalam bahasa Inggris), Edinburgh: Churchill Livingstone: 249–256, ISBN 978-0-443-10147-2, diakses tanggal 2022-08-09 
  2. ^ Mescher, Anthony L. (2018). "Blood". Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas (dalam bahasa Inggris) (edisi ke-15). McGraw-Hill Education. hlm. 237. ISBN 9781260026184. 
  3. ^ Marieb, Elaine N. (2007). Human Anatomy & Physiology  (edisi ke-Seventh). San Francisco: Pearson Benjamin Cummings. ISBN 978-0-8053-5910-7. 
  4. ^ Mychaleckyj, Josyf C; Farber, Emily A; Chmielewski, Jessica; Artale, Jamie; Light, Laney S; Bowden, Donald W; Hou, Xuanlin; Marcovina, Santica M (10 June 2011). "Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage". Journal of Translational Medicine. 9: 91. doi:10.1186/1479-5876-9-91. ISSN 1479-5876. PMC 3128059 . PMID 21663644. 
  5. ^ Fabre, Anne-Lise; Luis, Aurélie; Colotte, Marthe; Tuffet, Sophie; Bonnet, Jacques (30 November 2017). "High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere". PLOS ONE. 12 (11): e0188547. Bibcode:2017PLoSO..1288547F. doi:10.1371/journal.pone.0188547. PMC 5708797 . PMID 29190767. 
  6. ^ Gustafson, Sarah; Proper, Jacqueline A.; Bowie, E. J. Walter; Sommer, Steve S. (1 September 1987). "Parameters affecting the yield of DNA from human blood". Analytical Biochemistry (dalam bahasa Inggris). 165 (2): 294–299. doi:10.1016/0003-2697(87)90272-7. ISSN 0003-2697. PMID 3425899. 
  7. ^ Ahmed, Nishat Hussain; Samantaray, Jyotish Chandra (2014). "Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites". Journal of Clinical and Diagnostic Research. 8 (4): DH01. doi:10.7860/JCDR/2014/7559.4258. ISSN 2249-782X. PMC 4064892 . PMID 24959448. 
  8. ^ Ahmed, Nishat Hussain; Samantaray, Jyotish Chandra (2014). "Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites". Journal of Clinical and Diagnostic Research. 8 (4): DH01. doi:10.7860/JCDR/2014/7559.4258. ISSN 2249-782X. PMC 4064892 . PMID 24959448. 
  9. ^ Sherman, Angel (2018). Medical Parasitology. EDTECH. ISBN 9781839473531. 
  10. ^ Kochareka, Manali; Sarkar, Sougat; Dasgupta, Debjani; Aigal, Umesh (October 2012). "A preliminary comparative report of quantitative buffy coat and modified quantitative buffy coat with peripheral blood smear in malaria diagnosis". Pathogens and Global Health. 106 (6): 335–339. doi:10.1179/2047773212Y.0000000024. PMC 4005131 . PMID 23182137. 
  11. ^ Blumenreich, Martin S. (1990). The White Blood Cell and Differential Count (edisi ke-3rd). Butterworths. ISBN 978-0-409-90077-4. PMID 21250104.